紫外吸收光譜的基本原理
吸收光譜的產(chǎn)生
許多無色透明的有機(jī)化合物，雖不吸收可見光，但往往能吸收紫外光。如果用一束具有連續(xù)波長的紫外光照射有機(jī)化合物，這時(shí)紫外光中某些波長的光輻射就可以被該化合物的分子所吸收，若將不同波長的吸收光度記錄下來，就可獲的該化合物的紫外吸收光譜.
紫外光譜的表示方法
通常以波長λ為橫軸、吸光度A（百分透光率T%）為縱軸作圖，就可獲的該化合物的紫外吸收光譜圖。
吸光度A，表示單色光通過某一樣品時(shí)被吸收的程度 A=log(I0/I1), I0入射光強(qiáng)度，I1透過光強(qiáng)度；
透光率也稱透射率T，為透過光強(qiáng)度I1與入射光強(qiáng)度I0之比值，T= I1/I0透光率T與吸光度A的關(guān)系為 A=log(1/T)
根據(jù)朗伯-比爾定律，吸光度A與溶液濃度c成正比 A=εbc ε為摩爾吸光系數(shù)，它是濃度為1mol/L的 溶液在1cm的吸收池中，在一定波長下測得的吸光度，它表示物質(zhì)對光能的吸收強(qiáng)度，是各種物質(zhì)在一定波長下的特征常數(shù)，因而是檢定化合物的重要數(shù)據(jù)；c為物質(zhì)的濃度，單位為mol/L；b為液層厚度，單位為cm。
在紫外吸收光譜中常以吸收帶最大吸收處波長λmax和該波長下的摩爾吸收系數(shù)εmax來表征化合物吸收特征。吸收光譜反映了物質(zhì)分子對不同波長紫外光的吸收能力。吸收帶的形狀、λmax和εmax與吸光分子的結(jié)構(gòu)有密切的關(guān)系。各種有機(jī)化合物的λmax和εmax都有定值，同類化合物的εmax比較接近，處于一個(gè)范圍。
紫外吸收光譜是由分子中價(jià)電子能級躍遷所產(chǎn)生的。由于電子能級躍遷往往要引起分子中核的運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的變化，因此在電子躍遷的同時(shí)，總是伴隨著分子的振動(dòng)能級和轉(zhuǎn)動(dòng)能級的躍遷。考慮躍遷前的基態(tài)分子并不是全是處于最低振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級，而是分布在若干不同的振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級上；而且電子躍遷后的分子也不全處于激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級，而是可達(dá)到較高的振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級,因此電子能級躍遷所產(chǎn)生的吸收線由于附加上振動(dòng)能級和轉(zhuǎn)動(dòng)能級的躍遷而變成寬的吸收帶。此外，進(jìn)行紫外光譜測定時(shí)，大多數(shù)采用液體或溶液試樣。液體中較強(qiáng)的分子間作用力，或溶液中的溶劑化作用都導(dǎo)致振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)精細(xì)結(jié)構(gòu)的消失。但是在一定的條件下，如非極性溶劑的稀溶液或氣體狀態(tài)，仍可觀察到紫外吸收光譜的振動(dòng)及轉(zhuǎn)動(dòng)精細(xì)結(jié)構(gòu)。
分子軌道與電子躍遷的類型
分子軌道基本原理
根據(jù)分子軌道理論，當(dāng)2個(gè)原子形成化學(xué)鍵時(shí)，原子軌道將進(jìn)行線性組合形成分子軌道。分子軌道具有分子的整體性，它將2個(gè)原子作為整體聯(lián)系在一起，形成的分子軌道數(shù)等于所組合的原子軌道數(shù)。例如兩個(gè)外層只有1個(gè)S電子的原子結(jié)合成分子時(shí)，兩個(gè)原子軌道可以線性組合形成兩個(gè)分子軌道，其中一個(gè)分子軌道的能量比相應(yīng)的原子軌道能量低，稱為成鍵分子軌道；另一個(gè)分子軌道的能量比相應(yīng)的原子軌道能量高，稱為反鍵分子軌道（反鍵軌道常用*標(biāo)出）。
分子軌道中最常見的有σ軌道和π軌道兩類。σ軌道是原子外層的S軌道與S軌道、或Px軌道與Px軌道（沿χ軸靠近時(shí)）線性組合形成的分子軌道。成鍵σ分子軌道的電子云分呈圓柱型對稱，電子云密集于兩原子核之間；而反鍵σ分子軌道的電子云在原子核之間的分布比較稀疏，處于成鍵σ軌道上的電子稱為成鍵σ電子，處于反鍵σ軌道上的電子稱為反鍵σ電子。π軌道是原子最外層Py軌道或Pz軌道（沿χ軸靠近時(shí)）線性組合形成的分子軌道。成鍵π分子軌道的電子云分不呈圓柱型對稱，但有一對對稱，在此平面上電子云密度等于零，而對稱面的上下部空間則是電子云分布的主要區(qū)域。反鍵π分子軌道的電子云也有一對稱面，但2個(gè)原子的電子云互相分離，處于成鍵π軌道的電子稱為成鍵π電子，處于反鍵π軌道的電子稱為反鍵π電子。
含有氧、氮、硫等原子的有機(jī)化合物分子中，還存在未參與成鍵的電子對，常稱為孤對電子。孤對電子是非鍵電子，也稱為n電子。例如甲醇分子中的氧原子，其外層有6個(gè)電子，其中2個(gè)電子分別與碳原子和氫原子形成2個(gè)σ鍵其余4個(gè)電子并未參與成鍵，仍處于原子軌道上，稱為n電子。而n電子的原子軌道稱為n軌道。
電子躍遷的類型
根據(jù)分子軌道的計(jì)算結(jié)果，分子軌道能級的能量以反鍵σ軌道最高，而n軌道的能量介于成鍵軌道與反鍵軌道之間。分子軌道能級的高低次序如下：
σ*>π*>n>π>σ
電子躍遷方式主要有4種如圖1所示
圖1σ、π、n軌道及電子躍遷
1、σ σ* σ鍵鍵能高，要使σ電子躍遷需要很高的能量，大約780KJ.mol-1，是一種高能躍遷。這類躍遷對應(yīng)的吸收波長都在真空紫外區(qū)，在近紫外區(qū)是透明的，所以常用作測定紫外吸收光譜的溶劑。
2、 n σ* 分子中含有氧、氮、硫、鹵素等原子，則產(chǎn)生這種躍遷，它比σ σ* 躍遷的能量低得多。（甲硫醇 227nm，碘甲烷258nm）
3、π π* 不飽和化合物及芳香化合物除含σ電子外，還含有π電子。π電子容易受激發(fā)，電子從成鍵的π軌道躍遷到反鍵的π軌道所需的能量比較低。一般孤立雙鍵的乙烯、丙烯等化合物，其π π* 躍遷的波長在170-200nm范圍內(nèi)，但吸收強(qiáng)度強(qiáng)（104）。如果烯烴上有取代基或烯鍵與其它雙鍵共軛，π π*躍遷的吸收波長將紅移到近紫外區(qū)。芳香族化合物存在環(huán)狀的共軛體系，π π* 躍遷會(huì)出現(xiàn)三個(gè)吸收帶即E吸收帶、K吸收帶、B吸收帶（苯：184nm、203nm、256nm）。
4、 n π* 當(dāng)化合物分子中同時(shí)含有π電子和n電子則可產(chǎn)生這種躍遷，n π* ，所需的能量最低，其所產(chǎn)生的吸收波長最長，但吸收強(qiáng)度很弱（丙酮：280nm，15）。
電子躍遷類型與分子結(jié)構(gòu)及其存在的基團(tuán)有密切的關(guān)系,可以根據(jù)分子結(jié)構(gòu)來預(yù)測可能的電子躍遷（飽和烴 σ σ* ，烯烴 σ σ*、π π*， 脂肪醚σ σ*、n σ*，醛酮 π π* 、 n σ* 、
σ σ* 、 n π*）。
發(fā)色基團(tuán)、助色基團(tuán)和吸收帶
（1）發(fā)色基團(tuán)和助色基團(tuán)
發(fā)色基團(tuán) 能使化合物出現(xiàn)顏色的一些基團(tuán)。在紫外吸收光譜中沿用這一術(shù)語，其含義已經(jīng)擴(kuò)充到凡是能導(dǎo)致化合物在紫外及可見光區(qū)產(chǎn)生吸收的基團(tuán)，不論是否顯示顏色都稱為發(fā)色基團(tuán)。一般不飽和的基團(tuán)都是發(fā)色基團(tuán)（C=C、C=O、N=N 、三鍵、苯環(huán)等）。
如果化合物中有幾個(gè)發(fā)色基團(tuán)相互共軛，則各個(gè)發(fā)色基團(tuán)所產(chǎn)生的吸收帶將消失，而取代出現(xiàn)新的共軛吸收帶，其波長將比單個(gè)發(fā)色基團(tuán)的吸收波長長，吸收強(qiáng)度也顯著加強(qiáng)。
助色基團(tuán) 早期引入的一個(gè)術(shù)語，它是指那些本身不會(huì)使化合物分子產(chǎn)生顏色或者在紫外及可見光區(qū)不產(chǎn)生吸收的一些基團(tuán)，但這些基團(tuán)與發(fā)色基團(tuán)相連時(shí)卻能使發(fā)色基團(tuán)的吸收帶波長移向長波，同時(shí)使吸收強(qiáng)度增加。通常，助色基團(tuán)是由含有孤對電子的元素所組成（-NH2 , -NR2 , -OH , -OR , -Cl等），這些基團(tuán)借助P-π共軛使發(fā)色基團(tuán)增加共軛程度，從而使電子躍遷的能量下降。
各種助色基團(tuán)的助色效應(yīng)各不相同，以O- 為最大，F為最小。助色基團(tuán)的助色效應(yīng)強(qiáng)弱大致如下列順序。
F < CH3 <Cl < Br < OH < SH < OCH3 <NH2 <NHR < NR2 < O-
（二）紅移、藍(lán)移、增色效應(yīng)和減色效應(yīng)
由于有機(jī)化合物分子中引入了助色基團(tuán)或其他發(fā)色基團(tuán)而產(chǎn)生結(jié)構(gòu)的改變，或者由于溶劑的影響使其紫外吸收帶的最大吸收波長向長波方向移動(dòng)的現(xiàn)象稱為紅移。與此相反，如果吸收帶的最大吸收波長向短波方向移動(dòng)，則稱為藍(lán)移。
與吸收帶波長紅移及藍(lán)移相似，由于化合物分子結(jié)構(gòu)中引入取代基或受溶劑的影響，使吸收帶的強(qiáng)度即摩爾吸光系數(shù)增大或減少的想象稱為增色效應(yīng)或減色效應(yīng)。
（三） 吸收帶
在四種電子躍遷類型中，σ σ*躍遷和n σ*躍遷上產(chǎn)生的吸收帶波長處于真空紫外區(qū)。π π*躍遷和n π*躍遷所產(chǎn)生的吸收帶除某些孤立雙鍵化合物外，一般都處于近紫外區(qū)，它們是紫外吸收光譜所研究的主要吸收帶 。
由π π* 躍遷和n π*躍遷所產(chǎn)生的吸收帶可分為下述四種類型
1、R吸收帶 由含有氧、硫、氮等雜原子的發(fā)色基團(tuán)（羰基、硝基）n π*躍遷所產(chǎn)生， 吸收波長長，吸收強(qiáng)度低（乙醛 290nm，17）。
2、 K吸收帶 由含有共軛雙鍵（丁二烯、丙烯醛）的π π*躍遷所產(chǎn)生，K吸收帶波長大于200nm，吸收強(qiáng)度強(qiáng)（104）。
3、 B吸收帶 是閉合環(huán)狀共軛雙鍵的π π*躍遷所產(chǎn)生的，是芳環(huán)化合物的主要特征吸收峰。吸收波長長，吸收強(qiáng)度低（苯 256nm，215）。在非極性溶劑中或氣態(tài)時(shí)，B吸收大帶會(huì)出現(xiàn)精細(xì)結(jié)構(gòu)，但有一些芳香化合物的B吸收帶往往沒有精細(xì)結(jié)構(gòu)，極性溶劑的使用會(huì)使精細(xì)結(jié)構(gòu)消失。
4、 E吸收帶 芳香化合物的特征吸收帶，有兩個(gè)吸收峰，分別為E1帶和E2帶，E1的吸收約在180nm（ε＞104），E2的吸收約在200nm（ε=7000），都是強(qiáng)吸收，E1的吸收帶是觀察不到的，當(dāng)苯環(huán)上有發(fā)色基團(tuán)且與苯環(huán)共軛時(shí)，E2的吸收帶常和K吸收帶合并，吸收峰向長波移動(dòng)（苯乙酮，K 240nm，13000；B 278nm，1100；R 319nm ，59）
共軛體系與吸收帶波長的關(guān)系
只含孤立雙鍵的化合物如乙烯，其π π*躍遷的吸收波長處于真空紫外區(qū)。如果有兩個(gè)或多個(gè)雙鍵共軛，則π π*躍遷的吸收波長隨共軛程度增加而增加，這種現(xiàn)象稱為共軛紅移。表1列出了一些共軛烯烴的吸收光譜特征。從表中可以看出每增加一個(gè)共軛雙鍵，吸收波長約增加40nm當(dāng)雙鍵數(shù)達(dá)到7時(shí)，吸收波長將進(jìn)入可見光區(qū)。
| 化合物 | π π*躍遷（λ/nm） | 摩爾吸光系數(shù) |
| 乙烯 1,3-丁二烯 1,3,5-己三烯 二甲基辛四烯 癸五烯 | 170 217 256 296 335 | 1.5×104 2.1×104 3.5×104 5.2×104 11.8×104 |
表1 某些共軛烯烴的吸收特征
不同的發(fā)色基團(tuán)共軛也會(huì)引起π π*躍遷吸收波長紅移。如果共軛基團(tuán)中還含有n電子，則n π*躍遷吸收波長也會(huì)引起紅移（乙醛π π*，170nm n π*，290nm；丙烯醛分子中由于存在雙鍵與羰基共軛，π π*，210nm，n π*，315nm）。
共軛使吸收帶波長紅移，可以認(rèn)為是由于共軛形成了包括共軛碳原子之間的離域π鍵，π電子更容易被激發(fā)而躍遷到反鍵π軌道上。例如丁二烯分子中每個(gè)碳原子的Pz電子可以組成四個(gè)非定域分子軌道，即兩個(gè)成鍵π軌道π1、π2和兩個(gè)反鍵π軌道π3*、π4*，如圖2所示。當(dāng)丁二烯分子受到紫外光激發(fā)時(shí)，處于π2軌道上的電子只需接受較低的能量就可以躍遷到π3*軌道上，這就導(dǎo)致吸收帶波長紅移。
羰基與烯雙鍵共軛不但使電子在成鍵π軌道與反鍵π軌道之間躍遷的能量降低，也使n π*躍遷的能量降低，如圖4所示。非共軛雙鍵不會(huì)影響吸收帶的波長，但對吸收帶強(qiáng)度有增色效應(yīng)。
圖2 共軛雙鍵能級圖
圖3 羰基與烯雙鍵共軛能級圖
